醫(yī)學(xué)診斷
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數(shù)字PCR(dPCR)技術(shù)為慢粒“治愈”之路提供助力
2024-04-28
▎導(dǎo)讀
? ? ? ? ? 慢粒是慢性粒細(xì)胞白血?。╟hronic myeloid leukemia, CML）的簡(jiǎn)稱，也叫慢性髓性白血病，屬于血液系統(tǒng)的惡性腫瘤，占成年白血病患者的15%，全球年發(fā)病率為1.6~2/10萬。它的發(fā)病是由患者體內(nèi)第9號(hào)和22號(hào)染色體末端異位產(chǎn)生的BCR-ABL1融合基因所致，這也是國(guó)際慢粒日定在9月22日的原因，今年是第13個(gè)國(guó)際慢粒日。
▎慢粒成為可治、可控的“慢性疾病”
? ? ? ? ? 慢粒（CML）雖是一種造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，但自從有了酪氨酸激酶抑制劑(TKI)以來，其療效有了跨越性的改變，明顯改變了CML患者的預(yù)后及患病現(xiàn)況，被視為像高血壓、糖尿病一樣，是一種可治、可控的“慢性疾病”，甚至可通過規(guī)范化治療實(shí)現(xiàn)停藥達(dá)到臨床康復(fù)水平。
▎慢粒治療：規(guī)范監(jiān)測(cè)療效很重要
? ? ? ? ? ?愈來愈多的臨床研究數(shù)據(jù)表明，以伊馬替尼為代表的多種TKIs作為一線治療藥物使CML患者的10年生存率達(dá)85%~90%。由于TKIs療法不能完全根除白血病克隆，最初認(rèn)為治療需要無限期持續(xù)。然而，近年來，CML患者出現(xiàn)了停止治療的可能性。事實(shí)上，在臨床試驗(yàn)和現(xiàn)實(shí)人群中，大約50%處于穩(wěn)定深度分子緩解(DMR，MR4.0)的CML患者可以安全地停止TKI治療，而不會(huì)出現(xiàn)分子復(fù)發(fā)，從而進(jìn)入無治療緩解（treatment free remission,TFR）。
? ? ? ? ? ?TKIs治療獲得持續(xù)的深度分子學(xué)緩解（DMR）超過2年的患者，部分能夠獲得長(zhǎng)期的無治療緩解，即功能性治愈。功能性治愈成為越來越多CML患者追求的治療目標(biāo)。需要注意的是，停藥對(duì)DMR水平、停藥后監(jiān)測(cè)以及隨訪具有嚴(yán)格的要求，建議在專業(yè)醫(yī)師指導(dǎo)下進(jìn)行。
▎dPCR助力DMR患者穩(wěn)定、可靠監(jiān)測(cè)
? ? ? ? ? 隨著對(duì)CML患者BCR-ABL1轉(zhuǎn)錄本監(jiān)測(cè)的要求越來越高，分子技術(shù)在量化BCR-ABL1轉(zhuǎn)錄本方面的作用變得越來越重要，而細(xì)胞遺傳學(xué)分析方法因敏感性較低且提供信息不足等因素，其使用逐步在減少。
? ? ? ? ? ?實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)是常用的方法，但由于其固有的技術(shù)差異，在定量準(zhǔn)確性方面存在局限性。尤其在CML患者DMR水平的監(jiān)測(cè)中，多項(xiàng)研究表明，qPCR的敏感性不足以可靠地量化深度分子反應(yīng)(DMR)患者中殘留的低水平BCR-ABL1，這些患者可能有機(jī)會(huì)嘗試停止酪氨酸激酶抑制劑(TKI)治療。治療方案依賴于每個(gè)里程碑時(shí)間點(diǎn)所測(cè)得的BCR-ABL1融合比值，因此必須測(cè)量BCR-ABL1水平。
dPCR提高了DMR準(zhǔn)確定量和CML患者TKI停藥時(shí)機(jī)把控
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?Goh等人表述對(duì)入組CML患者(n=112)接受一線伊馬替尼治療，在TKI停藥前至少18個(gè)月通過qPCR檢測(cè)不到MRD (MR4.0或更高)。盡管qPCR結(jié)果陰性，但近25%的患者dPCR結(jié)果呈陽性。dPCR陽性組復(fù)發(fā)率高于dPCR陰性組，NPV為57% (p= 0.002)。
? ? ? ? ? ?Bernardi等人評(píng)估了dPCR在MRD監(jiān)測(cè)中的作用及其對(duì)持續(xù)TFR的預(yù)測(cè)價(jià)值。所有納入的患者持續(xù)DMR為MR4.0或更高至少2年，并接受TKI治療或中位治療99個(gè)月。他們追蹤了111名在臨床試驗(yàn)和現(xiàn)實(shí)實(shí)踐中嘗試停用TKI的患者，用dPCR將他們分為2個(gè)DMR類別，ROC分析臨界值為0.468 BCR-ABL1 拷貝/ml。DMR高于該臨界值的患者復(fù)發(fā)率比低于該臨界值的患者具有更高的復(fù)發(fā)率：DMR < 0.468copies/ml 的持續(xù) TFR 的 NPV 為 86%，而當(dāng) >0.468copies/ml 時(shí)，持續(xù)TFR 的NPV為52%（p=0.0003）。
? ? ? ? ? ?dPCR可在疾病不同程度上實(shí)現(xiàn)BCR-ABL1絕對(duì)定量，臨床靈敏度至少可達(dá)MR5.0，在DMR監(jiān)測(cè)上，具有明顯的優(yōu)勢(shì)。此外，dPCR已在多項(xiàng)研究中被驗(yàn)證為成功停止TKI治療的預(yù)后標(biāo)志，而使用經(jīng)典qPCR卻無法實(shí)現(xiàn)。因此，dPCR可能是前瞻性可靠地識(shí)別患者在開始TKI治療后達(dá)到治療里程碑以及選擇TKI停藥時(shí)機(jī)的選擇方法。
參考文獻(xiàn)：
1.Kockerols, C. C. B. et al. Digital PCR for BCR-ABL1 Quantification in CML: Current Applications in Clinical Practice. Hemasphere 4, e496, doi:10.1097/HS9.0000000000000496 (2020).
2.S. Bernardi et al., Digital PCR improves the quantitation of DMR and the selection of CML candidates to TKIs discontinuation. Cancer Med 8, 2041-2055 (2019).