CRISPR技術(shù)讓基因編輯觸手可及
CRISPR技術(shù)介紹
CRISPR技術(shù)提供了一種能夠?qū)蚪M進(jìn)行特異性定點(diǎn)改造的工具,它的出現(xiàn)代表了基因組工程的巨大突破。CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1為研究者在大量的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞類型中實(shí)現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性(SNPs), 插入, 基因敲除和基因抑制提供了一個(gè)工具。
科學(xué)家最初發(fā)現(xiàn)CRISPR是研究細(xì)菌,特別是E. coli的免疫系統(tǒng)抵御病毒感染的機(jī)制。通過生成RNA和一種被稱為Cas9的基因編輯核酸酶,能夠靶向剪切入侵病毒的DNA的基因序列。接下來研究人員意識(shí)到除了病毒,同樣的方法可被應(yīng)用于鑒別和編輯任何DNA序列,從而開啟了基因組工程的全新領(lǐng)域。
Cas9作為“分子剪刀”,是一種用于剪切DNA序列的核酸酶,該序列可以被CRISPR引導(dǎo)的RNA識(shí)別。這種生化反應(yīng)產(chǎn)生的“剪切”可以使基因失活,修復(fù)或者完全替換為一個(gè)新的DNA片斷。
- CRISPR/Cas9系統(tǒng)工作原理為:
通過引導(dǎo)RNA:crRNA:tracrRNA 復(fù)合體或sgRNA分子指引Cas9核酸酶在某個(gè)特定的基因組位點(diǎn)上進(jìn)行剪切。如下圖所示,sgRNA的可編輯靶向特異區(qū)域通過RNA-DNA 堿基互補(bǔ)結(jié)合到基因組靶位點(diǎn),啟動(dòng)DNA鏈剪切。S. pyogenes Cas9剪切的啟動(dòng)基于基因組靶位點(diǎn)臨近帶有(5′) NGG (3′)的PAM序列的5′-端。

Cpf1是最近發(fā)現(xiàn)的一種Cas9同源體,Cpf1比Cas9更小,使用一種保守的前間區(qū)序列鄰近基序(PAM)定位不同的序列。特別適用于富含AT堿基的基因組/區(qū)域。在單核苷酸多態(tài)性(SNPs)設(shè)計(jì)和基因敲除過程中,由于它可以產(chǎn)生一種交錯(cuò)切口,有利于促進(jìn)同源修復(fù)。
- 應(yīng)用
CRISPR與Cas9或Cpf1核酸酶的組合是應(yīng)用于基因組工程和研究的有效方法。CRISPR技術(shù)的應(yīng)用涉及基因治療,藥物開發(fā),農(nóng)業(yè),動(dòng)物模型,生物燃料,生物材料等更多領(lǐng)域。
- 優(yōu)勢(shì)
Synthego公司擁有好的設(shè)計(jì),研發(fā)和生產(chǎn)過程,確保CRISPRevolution產(chǎn)品家族的品質(zhì)及供貨速度。公司的專利技術(shù)可實(shí)現(xiàn):
? 高達(dá)90%的編輯效率
? 工作時(shí)間比質(zhì)??寺》s短了4倍
? 成本降低80%
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產(chǎn)品介紹
CRISPRevolution是針對(duì)CRISPR基因組編輯和研究設(shè)計(jì)的合成RNA組合。您提供序列,我們幫您合成。讓您用實(shí)惠的價(jià)格就能擁有高保真及高精確性基因編輯性能的RNA片斷。
EZ RNA試劑盒
EZ RNA CRISPR 試劑盒提供簡(jiǎn)單,精確,低成本的基因編輯,適用于crRNA:tracrRNA and sgRNA兩種模式。
CRISPR/Cas9 EZ RNA試劑盒為研究人員提供簡(jiǎn)便的CRISPR基因組編輯方案或者幫助尋找新的CRISPR 。試劑盒包含進(jìn)行成功轉(zhuǎn)染、CRISPR/Cas9基因定位和編輯的所有試劑成分。試劑盒具有sgRNA和cr:tracrRNA兩種引導(dǎo)RNA模式,同時(shí)您可選擇是否購買Cas9核酸酶。
1. Single Guide RNA模式
sgRNA無需退火,可直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染。它是一種用戶設(shè)計(jì)的17-20mer的單鏈RNA序列,可結(jié)合基因組中與PAM序列臨近的17-20mer的DNA靶序列。
在序列的3′-末端添加了80mer的Synthego支架(Scaffold)序列,您收到的sgRNA將是如下結(jié)構(gòu):
5′-AAUUUCACAGCUGCACAUA+Synthego Scaffold-3′
2. Two-Part cr:tracrRNA模式
2.1 crRNA
我們會(huì)在用戶提供的17-20mer的單鏈RNA序列的3′-末端加上22mer的連接(linker)序列,您收到的crRNA將是如下結(jié)構(gòu):
5′-AAUUUCACAGCUGCACAUA+Synthego Linker-3′
2.2 tracrRNA
我們已經(jīng)在S. pyogenes 的CRISPR/CAS系統(tǒng)基礎(chǔ)上對(duì)72mer的tracrRNA序列進(jìn)行了優(yōu)化,加上了擁有專利的連接(linker)序列。因此您無需另外提供EZ tracrRNA 序列。
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技術(shù)服務(wù)
公司日前已與美國(guó)SYNTHEGO公司簽署合作協(xié)議,在中國(guó)大陸地區(qū)開展CRISPR-Cas9基因編輯產(chǎn)品推廣及相關(guān)技術(shù)服務(wù)工作。